ABSTRACT
O presente estudo teve como objetivo investigar a ação do TNF-α frente ao biofilme deCandida albicans. Para tanto, cepas de C. albicans fracamente produtoras de biofilme(49BMv e 51BMv) e fortemente produtoras de biofilme (ATCC 10231 e CEMM 01.05.006)foram incubadas em meio RPMI em placas de 96 poços, a 35 ºC por 48 ou 96 horas paraavaliar o desenvolvimento do biofilme em formação e maduro, respectivamente, na ausênciaou presença de diferentes concentrações de TNF-α (0,1, 0,5, 1, 10, 20 e 40 ng/mL). A adiçãodo TNF-α foi realizada no momento do preparo do cultivo para avaliar seu efeito no biofilmeem formação ou após 48 horas de cultura para avaliação no biofilme maduro. Apósincubação, a atividade metabólica foi avaliada por meio do ensaio de redução de XTT. Aconcentração inibitória mínima (CIM) do TNF-α em C. albicans foi avaliada, dentre asconcentrações testadas 0,5, 1, 10 e 20 ng/mL, por meio da técnica de microdiluição em caldo,segundo documento M27-A3, preconizada pelo CLSI. Foi realizada uma análise da relaçãohifas/blastoconídios do biofilme por microscopia óptica, por meio de uma contagem dasformas filamentosas (hifas e pseudo-hifas) e leveduriformes e em seguida aplicada umafórmula que permitiu visualizar a relação entre a quantidade de formas filamentosas e asdemais estruturas. Os resultados indicaram uma marcante inibição da formação do biofilme deforma dose-dependente e uma discreta inibição do biofilme maduro pelo TNF-α...
The aim of this study was to investigate the activity of TNF-α against Candida albicansbiofilm. Therefore, week biofilm producer (49BMv and 51BMv) and strong biofilm producer(ATCC 10231 and CEMM 01.05.006) strains of C. albicans were incubated in RPMI mediumin 96-well plates at 35 °C for 48 or 96 hours in order to assess biofilm formation and maturebiofilm, respectively, in the absence or presence of different concentrations of TNF-α (0.1,0.5, 1, 10, 20 and 40 ng/ml). TNF-α was added during preparation of the biofilm to assess itseffect on biofilm formation or after 48 hours of culture for evaluation in mature biofilm. Afterincubation, the metabolic activity was assessed using XTT reduction assay. The minimuminhibitory concentration (MIC) of TNF-α against C. albicans was evaluated by brothmicrodilution technique according to Document M27-A3, recommended by CLSI, using theconcentrations 0.5, 1, 10 and 20 ng/mL. An analysis of the hyphae/blastoconidia ratio inbiofilm was performed using optical microscopy by couting of filamentous (hyphae andpseudo-hyphae) and yeast cells and then a formula which allowed visualization of therelationship between the amount of filamentous and other structures was applied. The resultsindicated that TNF-α showed a significant inhibition of biofilm formation in a dose-dependentway and a discrete mature biofilm inhibition. In addition, the analysis of hyphae/blastoconidiaratio showed a statistically significant reduction in the number of filamentous forms inbiofilm formation in the presence of TNF-α...